咪唑的性質
名稱：Imidazole； 1,3-diazacyclopenta-2,4-diene
CAS號：288-32-4
Compound ID：795
分子式： C3H4N2
分子量： 68.07726 [g/mol]
H-Bond Donor： 1
H-Bond Acceptor： 2
pKa： 7.1
熔點： 90-91℃
密度：1.23 g/cm 3
外觀：白色固體，或淡黃色固體
| UV absorption： | λ: 260 nm Amax: 0.10 |
| λ: 280 nm Amax: 0.10 |
咪唑與不同二價陽離子結合力強弱：（括弧內是結合常數對數，該值越大結合力越強）
Ca 2+ (0.1); Mn 2+ (1.6); Fe 2+ (3.3); Co 2+ (2.4); Ni 2+ (2.9); Cu 2+ (4.2); Zn 2+ (2.0)
溶液配制：
咪唑的水溶性很好，可達500mg/ml，溶液澄清。可以用咪唑來配制緩沖液，其緩沖范圍是pH6.2-7.8（25℃）。
穩定性及保存：
咪唑溶液很穩定，可以高溫滅菌處理。2-8℃可保存兩年。注意，應當避光保存。
注意：咪唑本身在紫外波段下有光吸收！
蛋白結晶用的緩沖液中是否應該除去咪唑？
問：過完Ni親和層析柱子之后，洗脫液（elute）中250mM（或500mM甚至1M）的咪唑是否應該出去？
答：一般情況下，單純過一個Ni柱是不夠的，即便是樣品足夠純，最好還是走一個凝膠過濾層析（分子篩）。走分子篩的過程當中可以很方便將咪唑除去。如果咪唑對于你樣品蛋白的穩定性和均一性很重要，則可以考慮保留一定濃度的咪唑，一般來說20mM - 200mM是比較合理的濃度范圍。一些情況下，如果有咪唑存在，蛋白便不能結晶，這時就需要除去咪唑。咪唑與蛋白之間的關系不能一概而論，不能說一定是什么樣的，要看是什么蛋白。例如，前面提到咪唑的合理濃度范圍是20mM - 200mM，但Artem G. Evdokimov有一個晶體只能在0.6M咪唑和乙酸緩沖液中長出來，晶體解析出來以后發現每個蛋白分子上結合了兩個咪唑分子。
有些情況下，經Ni柱純化獲得的蛋白樣品除去咪唑后發生沉淀，可能的原因是一部分Ni離子從柱子上脫離下來混在了樣品當中。當咪唑被除去以后，Ni便可以與蛋白上的His標簽結合造成蛋白質聚集。可以考慮利用螯合劑來除去那些多余的Ni離子。
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