1. 將未開封的測試片貯藏在<= 8 oC (46 oF)的環(huán)境下，并在包裝上標(biāo)示的有效期內(nèi)使用。在高濕度的地方，最好在使用前將測試片回復(fù)到室溫。
2. 已開封的測試片，將開口反折，用膠帶封好。
3. 為防止暴露于潮濕的環(huán)境中，請不要冷藏已開封的測試片。將膠帶封好的測試片貯藏在低溫干燥的地方，保持時間不超過1個月。請勿將測試片放在溫度> 25 oC (77 oF)和(或)相對濕度> 50%的環(huán)境中。
4. 用涂抹棒、海棉或其它采樣設(shè)備收集環(huán)境樣本。濕潤采樣設(shè)備的液體應(yīng)<= 10 mL。濕潤劑可以是無菌水、緩沖蛋白胨水(Buffered Peptone Water, BPW)，或中和緩沖液，如Letheen肉湯或Dey/Engley (DE)中和肉湯。
5. 在無菌環(huán)境下在收集的樣品中添加5 mL，20-30oC，滅過菌的緩沖蛋白胨水(BPW)溶液。 不要將Petrifilm EL測試片與Vermont 培養(yǎng)基(UVM)、Fraser肉湯、李斯特菌增菌培養(yǎng)基 (LEB)或緩沖李斯特菌增菌培養(yǎng)基(BLEB)共用。
6. 混合，蠕動或旋轉(zhuǎn)樣品與BPW的混合液將近一分鐘。將樣品置于室溫(20-30 oC) 1h，最久不超過1.5 h，以修復(fù)損傷的李斯特菌。
7. 將測試片置于平坦表面處，揭開上層膜。
8. 用移液器垂直滴加3 mL樣品到下層膜的中央。
9. 將上層膜緩慢蓋下，以免產(chǎn)生氣泡。
10. 輕輕地將塑料壓板放在位于接種區(qū)上層膜上。不要壓，扭轉(zhuǎn)或滑動壓板。提起壓板。等至少10分鐘，以使膠體凝固。
11. 將測試片透明面朝上，可疊放至10片，在35oC ± 1oC或37oC ± 1oC下培養(yǎng)28h ± 2 h。
12. Petrifilm EL測試片能夠用標(biāo)準(zhǔn)的菌落計數(shù)器或其它光學(xué)放大器計數(shù)或判讀。不要計數(shù)圓形輪廓上的菌落，因為它們不受選擇性培養(yǎng)基的作用。
13. 1對于定性檢測，根據(jù)紫紅色菌落的存在與否，將結(jié)果計為檢出和未檢出。
如果是/否的結(jié)果已經(jīng)能夠滿足報告要求，那么你可以選擇定性檢測。
14. 對于半定量檢測，根據(jù)出現(xiàn)紫紅色菌落的相對量來記錄結(jié)果。 如果你是根據(jù)菌落數(shù)的相對含量來采取相應(yīng)的措施，并且沒必要記錄實際菌落數(shù)，那么你可以選擇半定量檢測。李斯特菌的含量應(yīng)記錄為對采樣區(qū)域和企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)有指導(dǎo)意義的形式(如低，中，高，或可接受和不可接受)
15. 對于定量檢測，計數(shù)所有紫紅色菌落。 如果你根據(jù)菌落數(shù)來采取相應(yīng)的措施，你可以采用定量檢測。測試片上李斯特菌數(shù)：16
請參考判讀手冊的“定量采樣與判讀”部分來計算每個環(huán)境樣本中的李斯特菌數(shù)。
16. 可挑區(qū)菌落進行進一步鑒定。掀起上層膜，從膠上挑取菌落。
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